洁净室中非可存活粒子和可存活微生物粒子之间存在着一定的联系（见USP Chapter <1116>，“洁净室及其他受控环境的微生物评估”）。也有研究指出洁净室中自由悬浮的可存活微粒的大小。当将这两个独立的研究结合在一起，如果工作人员能够控制洁净室中的大粒子，就可以控制洁净室中生物污染风险。照常来说，由于统计的数值非常小（<1粒子或<1CFU），这很难得出结论。但是，当分析洁净室内部的环境数据时，5.0μm大小的粒子就显得特别重要。

偶尔产生高计数的原因可能是由于电子粒子计数器的干扰，尽管一些粒子计数器具有一些元件，能够减少这样的干扰影响，并降低洁净室中随机粒子的影响。鉴于一个事实，即，在统计分析中，随机事件不能用小数值来解释，并且与一般的生产活动没有什么相关性，当做洁净室性能的长期分析时，这些是可以放在最后阶段来分析的。比较关键的是，连续或是规律的低级别粒子计数，这些可能会给出一定的线索，指向需要调查的可能存在的污染。)

对于无菌罐装需要进行冷冻干燥的产品，从塞子的插入点到冰冻干燥机都应该维持A等级环境。如果这是在一个移动推车中实现的，那么这个移动的环境也必须维持A等级环境。当塞子没有完全插入，小瓶就被认为是打开的，任何无菌瓶子的打开环境必须维持在一个可控制的环境下。

一旦冷冻干燥完成后，塞子塞入瓶中或是用机械压力保证封闭，塞子要通过一定的验证方案保证完全密封，小瓶应该保持处于A 等级的空气中，直到盖帽盖在适当的位置并紧固。重新回顾验证过程中的表格：A等级A环境是一个ISO 5级的环境。因此，从粒子观点来看，压接处理过程中提供的空气质量应当是ISO 5级品质。如果盖帽行为在无菌处理中执行，那么必须是A等级环境。

第一步：将设备监控系统的所有值设为m3N_

第二步：设置0.5μm报警通道（1=警告, 3=报警）到1625和3250 n/m3。（这些值是临时值，直到从工艺中发现真实值。）

第三步：设置1级报警（警告0.5μm）反应频率为2:2事件。因此，两个连续事件将触发一个警告= 橙色灯。

第四步：设置3级报警（0.5 μm报警）反应频率3:3事件。因此三个连续事件触发一个报警 = 红灯。

第五步：设置5.0-μm报警通道（0 =警告，2 = 报警）到71和35n/m3。（这些是一样的，但是我们将用不同的频率来确定风险。）

● 连续：如果在洁净室中持续出现等级为5.0-μm的粒子，应该采取一些调查工作，因为大的粒子不能穿透过滤器。因此，污染可能发生环境内部的某个点上。

● 频繁：当频繁产生大的粒子
而非随机时，应该确定这些粒子的来源，可能在哪里存在，并做出调整。粒子的影响与最终产品的测试相联系，定义出什么等级的粒子是有害的。

● 随机：当粒子几乎不可能或根本没有产生的可能时，应该确定频率N/M，例如，在任意12分钟内或是类似的情况下，不多于3个粒子。另外，应该与最终产品测试相关联，确认常规监控的数据。